色譜柱基本上是每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的一種實(shí)驗(yàn)室耗材,當(dāng)使用效果已經(jīng)無法滿足實(shí)驗(yàn)需求的時(shí)候,就需要考慮更換新的色譜柱了。
那么如何判斷更換新色譜柱的時(shí)間呢?
(1)使用壓力、分離度和峰形的混合指標(biāo)來考察一根色譜柱的狀態(tài)。
壓力的測(cè)量是最容易的,通常我們確定的色譜方法要滿足以下的要求:用新柱子時(shí)柱壓不高于2500psi,在任何情況下壓力都不超過3000psi。有統(tǒng)計(jì)表明,超過60%的色譜柱損壞是由于壓力過高的原因。
分離度是考察色譜柱的一個(gè)非常重要的指標(biāo),只要兩個(gè)組分可以獲得基線分離,對(duì)該分析物的定量就不會(huì)有什么問題。對(duì)于對(duì)稱的高斯峰來講,1.5的分辨率即可得到基線分離;若Rs在1.7至2.0之間則更好。若峰拖尾嚴(yán)重則需要更高的分辨率。使用分辨率作為色譜柱的評(píng)價(jià)指標(biāo)的好處在于我們可以直觀地看到相鄰的峰的分離情況。
(2)另外一個(gè)考察色譜柱質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)是峰形拖尾情況。
廠家測(cè)試報(bào)告的峰形都非常漂亮,但這并不代表該色譜柱分析實(shí)際樣品的情況。通常,在開發(fā)分析方法的過程中,一般會(huì)試驗(yàn)幾根色譜柱,分析足夠多的實(shí)際樣品,就知道當(dāng)分離變差時(shí)是什么樣的情況。